Bioanalytical Challenges in Toxicology: Innovative Solutions for Bioanalysis of Xenobiotics and Their Metabolites
Széles Aliz
Gyógyszertudományok és Egészségügyi Technológiák Tagozat
Dr. Zelkó Romána
HUN-REN TTK földszinti kis előadóterem
2026-10-12 10:00:00
Experimentális és klinikai farmakológia
Dr. Szökő Éva
Dr. Monostory Katalin
Dr. Tótfalusi István
Dr. Szabó Pál
Dr. Szökő Éva
Dr. Zelles Tibor
Dr. Turiák Lilla
A szisztémás expozíció pontos értékelése alapvető követelmény a kémiai biztonsági vizsgálatokban. A klasszikus bioanalitikai megközelítések azonban gyakran nem megfelelőek a kémiailag instabil vegyületek, az endogén biomarkerek vagy a komplex gyógyszerhatóanyagok esetében. Ezért a jelen PhD munka olyan testreszabott analitikai megoldások fejlesztésére és alkalmazására összpontosított, amelyek megbízható adatokat szolgáltatnak az ipari glicidil-éterek, és egyes gyógyszerek, valamint az endogén biomarker porfirinek kockázatértékeléséhez.
Az izopropil-glicidil-éter (IPGE), amely az epoxigyanták reaktív ipari hígítója, vizsgálatához LC-APCI-MS/MS módszert fejlesztettünk ki, amely során a Meerwein-reakciót használtuk ionforráson belüli származékképzési stratégiaként, ezzel leküzdve az analit gyenge ionizációs képességét. A validált módszer 0,01 µg/mL-es alsó méréshatárral (LLOQ) lehetővé tette az IPGE toxikokinetikájának első részletes jellemzését patkányokban. A kvalitatív profilalkotással hét lehetséges metabolitot azonosítottunk, melyből feltételezhető, hogy az eliminációt elsősorban az epoxid-hidrolízis és a glutation-konjugáció vezérli.
A protoporfirin IX, amely endogén biomarker, kvantifikálására alkalmas módszert dolgoztunk ki. Az analitmentes vakmátrix hiányának kezelésére helyettesítő mátrix (surrogate matrix) megközelítést alkalmaztunk, amelyhez fotodegradált, autentikus patkányplazmát használtunk. Szelektív HPLC-FLD módszert validáltunk az ICH M10 irányelveket alkalmazva, amely megfelelő párhuzamosságot (paralelizmust) mutatott a helyettesítő és az autentikus mátrixok között. Ezt a módszert sikeresen alkalmaztuk az 5-aminolevulinsav által indukált protoporfirin IX képződés kinetikájának nyomon követésére in vivo patkányvizsgálatban.
Nem utolsó sorban a különböző gyógyszerek toxikológiai és biztonsági vizsgálataiban sokoldalú bioanalitikai támogatást nyújtottunk. Különböző toxicitás típusokat indukáló modell vegyületek meghatározására dolgoztunk ki módszereket (vesetoxicitás: gentamicin; májtoxicitás: amoxicillin, klavulánsav, paracetamol; szívtoxicitás: doxorubicin, izoprenalin). Ezek a módszerek nagy érzékenységgel, gyors futásiidővel és egyszerűsített mintaelőkészítéssel jellemezhetőek. A mérési eredmények támogatták az extracelluláris vezikulákhoz kapcsolódó biomarkerek vizsgálatát mind in vitro, mind in vivo toxicitási modellekben.
Összefoglalva, az ebben a munkában bemutatott analitikai megoldások – az ionforráson belüli kémiai származékképzéstől a helyettesítő mátrix megközelítésen át a gyógyszerhatóanyagokra szabott gyors módszerekig – szilárd alapot biztosítottak a biztonsági kutatások összetett bioanalitikai kihívásainak megoldásához.
